Mikroskopiese metodes in Mikrobiologie

представляют собой способы изучения разнообразных объектов с использованием специального оборудования. Mikroskopiese navorsingsmetodes is maniere om 'n verskeidenheid van voorwerpe met die gebruik van spesiale toerusting te verken. Dit stel ons in staat om die struktuur van stowwe en organismes, die grootte van wat buite die grense van 'n besluit van die menslike oog te oorweeg. Die artikel gee 'n kort ontleding van die mikroskopiese metodes.

oorsig

используют в своей практике разные специалисты. Moderne metodes van mikroskopiese ondersoek met behulp van verskillende kundiges in hul praktyk. Onder hulle is die viroloë, sitologie, hematologie, morfologie, en ander. Die belangrikste metodes van mikroskopiese ondersoek is bekend vir 'n lang tyd. Die eerste is 'n ligte manier van kyk na voorwerpe. In onlangse jare, aktief bekendgestel in die praktyk, en ander tegnologie. . So, die gewildheid van verworwe fase-kontras, liggewende, inmenging, polarisasie, infrarooi, ultraviolet, stereoskopiese metode van navorsing. Almal van hulle is gebaseer op 'n verskeidenheid van eiendomme van die lig. . Daarbenewens, wyd gebruik elektronmikroskopie metodes. Hierdie metodes toelaat dat die vertoning voorwerpe met 'n directional vloei van gelaaide deeltjies. Daar moet kennis geneem word dat hierdie studie metodes word gebruik nie net in biologie en medisyne. в промышленности. Baie gewild metode van mikroskopiese studie van metale en legerings in die bedryf. Dit laat die studie om die gedrag van die verbindings te evalueer om tegnologie om die waarskynlikheid van fraktuur en verhoogde krag te verminder produseer.

Lig maniere: eienskappe

и других объектов базируются на различной разрешающей способности оборудования. Sulke mikroskopiese metodes vir die bestudering van mikroörganismes en ander fasiliteite wat gebaseer is op verskillende resolusie toerusting. 'N belangrike faktor in hierdie is die rigting van die balk eienskappe van die voorwerp self. Laasgenoemde, in die besonder, kan deursigtig of ondeursigtig wees. In ooreenstemming met die eienskappe van die voorwerp, die verandering van die fisiese eienskappe van die lig vloed - die helderheid en kleur as gevolg van die amplitude en die golflengte, vliegtuig, fase en rigting van golfvoortplanting. . Op die gebruik van hierdie eienskappe en bou verskillende mikroskopiese metodes.

spesifisiteit

Om die weë van die lig voorwerpe bestudeer, gewoonlik gevlek. Dit maak dit moontlik om hierdie of ander eienskappe te identifiseer en te beskryf. Dit is nodig dat die weefsel is vasgestel, aangesien die kleur openbaar sekere strukture uitsluitlik in selle vermoor. In lewende selle skei 'n kleurstof in die vorm van vakuole in die sitoplasma. Sy het nie verf oor die struktuur. Maar met die lewendige voorwerpe en ondersoek kan word met behulp van 'n ligmikroskoop. Vir hierdie doel, belangrike manier van leer. In sulke gevalle, 'n darkfield condensor. Dit is ingesluit in die ligmikroskoop.

Die bestudering van ongeverfde voorwerpe

Dit word uitgevoer deur fase-kontras mikroskopie gedra. Hierdie metode is gebaseer op die diffraksie van die balk in ooreenstemming met die eienskappe van die voorwerp. Gedurende die blootstelling gemerk verandering in fase en golflengte. In die mikroskoop lens is teenwoordig deurskynende bord. Woon of vaste, maar nie geverf voorwerpe as gevolg van sy deursigtigheid, amper nie van kleur verander, en die amplitude van die bundel wat deur hulle, uitdagende net 'n verskuiwing van die golf fase. Maar in hierdie geval, nadat dit deur die voorwerp, die lig vloed gedeflekteer deur die bord. As gevolg hiervan, tussen die balke, ontbreek deur die voorwerp en die aangaan van 'n ligte agtergrond, die golf lengte verskil voorkom. Op 'n sekere waarde van sy visuele effek plaasvind - die donker voorwerp sal duidelik sigbaar op 'n ligte agtergrond, of andersom (in ooreenstemming met die eienskappe van 'n fase plaat) wees. Bekombaar hierdie verskil moet ten minste 1/4 golflengte wees.

Anoptralny metode

Hy is 'n soort van fase-kontras metode. Anoptralny metode behels die gebruik van 'n lens met 'n spesiale plate, wat net die kleur en helderheid van die omgevingslicht verander. Dit brei grootliks die moontlikhede van die bestudering van ongeverfd lewende voorwerpe. , паразитологии при изучении растительных и животных клеток, простейших организмов. Toegepaste fase kontras mikroskoop metode navorsing in mikrobiologie, parasitologie in die studie van plant- en dierselle, protosoë. In die hematologie metode word gebruik om te bereken en bepaal die onderskeid van bloedselle en beenmurg.

inmenging tegnieke

решают в целом те же задачи, что и фазово-контрастные. Hierdie mikroskopiese navorsingsmetodes algemeen dieselfde probleme as fase kontras op te los. Maar in die laasgenoemde geval, kenners kan net kyk na die kontoere van voorwerpe. методы исследования позволяют изучать их части, выполнять количественную оценку элементов. Die inmenging mikroskopiese navorsingsmetodes ons in staat stel om hul deel te studeer, uit te voer 'n kwantitatiewe assessering elemente. Dit is moontlik as gevolg van die verdeling van die ligstraal. Een stroom loop deur die deeltjie voorwerp, en die ander - deur. In die oogstuk van die mikroskoop hulle te ontmoet en te meng. Die gevolglike faseverskil kan bepaal word deur gewig van verskillende sellulêre strukture. Wanneer opeenvolgende meting is met die voorafbepaalde brekingsindeks kan ingestel word dik unfixed weefsel en lewende voorwerp, die proteïen-inhoud daarin, die konsentrasie van vaste stowwe en water, en so meer. In ooreenstemming met die ontvang data spesialiste in staat is om membraandeurlaatbaarheid, ensiemaktiwiteit, selmetabolisme indirek evalueer.

polarisasie

Dit word uitgevoer deur middel van Nicol prismas of filmy Polaroids gedra. Hulle word tussen die model en die lig bron. позволяет изучать объекты с неоднородными свойствами. Polariserende mikroskopie metode van navorsing in mikrobiologie stel ons in staat om voorwerpe met inhomogeneous eienskappe te bestudeer. In isotropies strukture die spoed van voortplanting van lig is onafhanklik van die gekose vlak. In die anisotrope stelsels koers wissel na gelang van die lig georiënteerde langs die dwars of lengte-as van die voorwerp. As die brekingsindeks waarde langs die struktuur groter as langs die dwars sal wees, skep 'n positiewe dubbele refraksie. Dit is tipies van baie biologiese voorwerpe wat 'n streng molekulêre oriëntasie gevind het. Hulle almal is anisotrope. In hierdie kategorie, in die besonder, die miofibrille, neurofibrils, silia in die gesilieerde epiteel, kollageenvesels en ander.

polarisasie waarde

'N Vergelyking van die aard van bestraling en die brekingsindeks anisotropie van die voorwerp maak dit moontlik om die molekulêre struktuur van die organisasie te bepaal. Polarisasie metode dien as een van die histologiese analise metodes gebruik in sitologie en dies meer. Nie net geverf voorwerpe kan bestudeer word in die lig. Polarisasie metode maak dit moontlik om vlekkeloos te bewaar en unfixed ondersoek - moedertaal - voorbereidings van weefsel afdelings.

fluorescent tegnieke

Dit is gebaseer op die eienskappe van sekere voorwerpe gee gloei in die blou-violet gedeelte van die spektrum of UV-strale. Baie stowwe soos proteïene, sommige vitamiene, koënsieme, dwelms, toegerus met 'n primêre (nl) luminessensie. Ander voorwerpe begin gloei deur die toevoeging van 'n fluorochrome - spesiale kleurstowwe. Hierdie toevoeging is selektief diffuse of versprei word in afsonderlike sellulêre strukture of chemiese verbindings. Hierdie eiendom is die basis van die gebruik van fluoresserende mikroskopie met histochemiese en sitologiese studies.

Gebiede van gebruik

Met behulp van immuno-fluoressensie kundiges op te spoor virale antigene en hul konsentrasie aangepas word geïdentifiseer virusse anti liggame en antigene, hormone, verskeie metaboliese produkte en so aan. In hierdie verband het die diagnose van herpes, pampoentjies, hepatitis B, griep en ander infeksies met behulp van fluorescent metodes van materiaal navorsing. иммуно-флуоресцентный способ позволяет распознавать опухоли злокачественного характера, определять ишемические участки в сердце на ранних этапах инфаркта и пр. Mikroskopiese immuno-fluorescent metode ontdek gewas maligniteit, bepaal isgemiese gebiede van die hart in die vroeë stadiums van 'n hartaanval en so aan.

Die gebruik van ultraviolet

Dit is gebaseer op die vermoë van 'n aantal van stowwe in lewende selle of mikro-organismes is vasgestel, maar ongekleurd deursigtige onder sigbare lig materiale absorbeer UV-strale van 'n spesifieke golflengte. Dit is waar in die besonder vir 'n hoë-molekulêre verbindings. Dit sluit in proteïene, aromatiese sure (methylalanine, triptofaan, tirosien, ens), nukleïensure en purien basisse piramidinovye en so aan. UV mikroskopie toelaat om die ligging en aantal van hierdie verbindings spesifiseer. In die studie van lewende dinge kan professionele die veranderinge in hul metaboliese prosesse in ag te neem.

Daarbenewens

Infrarooi mikroskopie gebruik in die studie is ondeursigtig aan die lig en ultraviolet strale deur opname van die voorwerpe vloei strukture waarvan die golflengte 750-1200 nm. Om hierdie metode is daar geen behoefte om te pre-blootstel die dwelms om chemiese behandeling toe te pas. Tipies, is die IR metode wat gebruik word in antropologie, dierkunde en ander wetenskappe bedryf. Soos vir medisyne, is hierdie metode word hoofsaaklik gebruik in oftalmologie en Neuromorphology. Die studie-dimensionele voorwerpe deur gebruik te maak van 'n stereoskopiese mikroskoop. hardeware-ontwerp maak voorsiening vir die monitering van die links en regs oog op 'n ander hoek. Ondeursigtig voorwerpe word ondersoek teen relatief lae vergroting (120 keer op die meeste). Stereoskopiese metodes word gebruik in Micro, Pathomorphology in geregtelike geneeskunde.

elektronmikroskopie

Dit word gebruik om die struktuur van selle en weefsels te bestudeer in die makromolekulêre en subsellulêre vlakke. Elektronmikroskopie ons toegelaat om 'n kwalitatiewe sprong in die veld van navorsing maak. Hierdie metode word algemeen gebruik in biochemie, onkologie, virologie, morfologie, immunologie, genetika, en ander velde. Beduidende verbetering van die resolusie wat deur die toerusting kapasiteit vloei van elektrone wat deur die elektromagnetiese veld vakuum te slaag. Laasgenoemde het op sy beurt, skep spesiale lense. Elektrone in staat is om deur middel van die struktuur van die voorwerp te slaag of weerkaats van hulle met afwykings uit verskillende hoeke. Die resultaat is vertoon op die fluorescent skerm van die toestel. As oordrag mikroskopie planêre oog verkry wanneer onderskeidelik skandering omring.

voorvereistes

Dit is opmerklik dat voor die pas elektroniese mikroskopiese ondersoek, die voorwerp is onderworpe aan spesiale opleiding. In die besonder, die gebruik van fisiese of chemiese binding van weefsel en organismes. Deursnee biopsie materiaal en, bykomend, ontwater, is ingesluit in epoxyhars, sny glas of diamant messe op ultradun dele. Toe hulle kontras en studie. Die skandering mikroskoop ondersoek die oppervlak van voorwerpe. Om dit te doen, gespuit hulle 'n spesiale stof in die vakuum kamer.